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分光光度計(jì)的使用需要注意哪些細(xì)節(jié)呢?

更新時(shí)間:2020-04-16

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  分光光度計(jì)主要采用分光光度法,利用物質(zhì)對(duì)某種波長(zhǎng)的光具有選擇性吸收的特性以鑒別物質(zhì)或測(cè)定其含量。能夠快速準(zhǔn)確的測(cè)量核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞溶液的濃度。每次測(cè)量所需要的樣品量?jī)H需0.5至2ul即可。直接將樣品點(diǎn)于加樣板上。無(wú)需比色杯或毛細(xì)管等附件。測(cè)量結(jié)束后,可以選擇直接將樣品擦去或者再用移液器回收樣品。所有步驟簡(jiǎn)單快速,一氣呵成。
  使用分光光度計(jì)的注意事項(xiàng)都是什么?
  1)為了防止光電管疲勞:
  不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷,以延長(zhǎng)光電管使用壽命。
  2)比色皿的使用方法:
 ?、倌帽壬髸r(shí):
  手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
 ?、谇逑幢壬髸r(shí):
  一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機(jī)物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)立即洗凈比色皿。
 ?、郾壬笸獗诘乃貌羚R紙或細(xì)軟的吸水紙吸干:
  以保護(hù)透光面。
 ?、軠y(cè)定有色溶液吸光度時(shí):
  一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí),通常都按由稀到濃的順序測(cè)定,以減小測(cè)量誤差。
 ?、菰趯?shí)際分析工作中:
  通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
  分光光度計(jì)的特點(diǎn)是只有一條光束。通過(guò)交換參比和樣品的位置,使其分別進(jìn)入光路。在參比(溶劑)進(jìn)入光路時(shí),調(diào)零。然后將樣品進(jìn)入光路的信號(hào)和參比信號(hào)進(jìn)行比較,就可在顯示器上讀出樣品的透過(guò)率和吸光度。分光光度計(jì)由于在每個(gè)波長(zhǎng)都需要變換參比和樣品的位置,所以只能手動(dòng),不能掃描吸收光譜。它的結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單,使用也有一定限制,但如配置程序控制和打印裝置,則對(duì)一些常規(guī)的定量測(cè)定還是比較適用的。
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